Najstarsza znana kopia Mony Lisy znajduje się w muzeum Prado w Madrycie. Jak podało muzeum, powstała ona w pracowni samego Leonarda, w czasie gdy mistrz kończył oryginalny portret.
Prado poinformowało, że dopiero niedawna konserwacja obrazu z jego zbiorów ujawniła warstwy ukryte do tej pory na płótnie. Madrycka kopia ukazuje półpostać Mony Lisy, ale do czasu zdjęcia przemalówek i poczerniałego werniksu nie widać było pejzażu w tle. Rzeczniczka muzeum powiedziała, że do tej pory kopię z Madrytu uważano za pośledniej jakości obraz.
Jak pisze hiszpańska gazeta "El Pais", specjaliści z Luwru zgodzili się z nową oceną kopii z Prado. Dziennik "El Mundo" nazywa ją "bliźniaczką Mony Lisy". Cytuje przedstawicieli muzeum, według których kopia ta zachowała się w niektórych partiach lepiej od oryginału i posłuży do dalszych badań nad arcydziełem Leonarda.
Kopii Mony Lisy powstałych w XVI i XVII wieku jest kilkadziesiąt. Oryginał wisi w Luwrze. Replikę z Madrytu poddano zabiegom konserwatorskim przed planowanym wyjazdem obrazu na właśnie w paryskim muzeum.